养肝网 > 护肝 > 正文>
综合
问医生

要辨证看待HBVDNA检测

来源:养肝网2015-04-25 个评论我要订阅
    目前,HBVDNA定量检测已经走进大小医院,甚至于各种诊所,每一个乙肝患者在诊疗过程中,都要反复检测该指标,HBVDNA定量往往被描述成为判断乙肝传染性大小,判断病情严重程度以及治疗效果的“金指标”,其实这些认识都存在误区和片面。HBVDNA定量检测的确为了解HBV在体内的变化增添了新的手段,HBVDNA检测弥补了已往HBV“两对半”检测的不足,只要抽血化验检测HBVDNA呈阳性,无论其他HBV检测结果如何,都说明患者体内存在复制状态的HBV,血液具有一定传染性。利用聚合酶链反应(PCR)技术可以将极微量(pg水平)的基因材料特异性地扩增百万倍,定量PCR可以将体内病毒数量化,这样对于评估治疗效果和了解病情变化有一定的帮助意义,但是目前HBVDNA检测尚处于研究阶段,并非完美无缺,由于DNA定量检测要求检测到血液中极其微小的病毒含量,各种实验条件和仪器设备,要求甚高,左右实验结果的因素众多,而实验本身准许有一定程度的偏差,这样一来,DNA定量只能在部分有条件的大医院检测,结果也只能用于参考,不能当作确诊的“金指标”,在各个大小医院普及。
  
  1  HBVDNA检测及其积极意义HBVDNA检测是通过一种较为先进的检测技术——聚合酶链反应(即PCR检测方法),检测出存在于体内极其微量的HBVDNA基因的一种新的检验方法。HBVDNA是乙肝病毒的核心成分,是病毒复制的发动机,它是存在于乙肝病毒核心部分的一种遗传物质,由许多碱基串联而成的双链样结构,其中存储有大量的遗传信息即基因,可以随乙肝病毒的复制而复制。乙肝病毒基因非常微小,由3.200个左右的核苷酸环组成,使用一般的生化和免疫技术,根本无法检测到这样微量的物质,只有通过体外基因扩增技术对核酸分子进行扩增,才能检测出极微量的病毒。患者的血清中含有微量的HBVDNA,它们在内外引物的作用下,使其HBVDNA特异性片段在设定的条件下不断扩增到原来的数百万倍,再通过扩增仪器检测,可以定出检测指标到底有多大量,PCR方法可以检测到1fg/ml或1011拷贝/毫升的病毒DNA数量。PCR检测方法不仅可以用于检测乙肝病毒DNA,它还广泛用于其他各种微量病毒或微生物的DNA检测中,例如非典病毒、艾滋病毒等,这项检测技术具有快速、简便、敏感和特异等特点。PCR检测方法如果使用得当、技术过关,具有灵敏度高、准确性强的特点。如果患者抽血化验HBVDNA为阳性,这是乙肝病毒感染并复制的直接证据,HBVDNA不仅能够定性,也可以通过核酸分子杂交技术,检测出外周血中HBVDNA的具体数量,分析患者血中乙肝病毒DNA数量的多少,可以判断乙肝病毒复制程度及传染性强弱,同时也能评价和监测抗病毒药物的疗效,若要达到这样全部的程度,必须首先取决于实验结果的高度准确性和统一性。有研究表明乙肝病毒携带者传染性大小与HBVDAN的滴度呈正相关,也就是说滴度越高,传染性越强。不少乙肝患者接受抗病毒治疗,是否有效,往往首先通过检测HBVDNA的滴度反映出来,如果治疗前滴度较高,治疗后,滴度逐渐下降,甚至转阴,说明治疗有效。另外检测HBVDNA还可以最大限度地防止乙肝阳性患者的漏诊,已往献血或体检筛选乙肝患者,通常只检查乙肝病毒表面抗原或乙肝病毒五项指标(俗称“两对半”),如果乙肝病毒表面抗原为阴性,一般就可以排除乙肝诊断,现在研究发现,许多表面抗原阴性的异型乙肝并不少见,不少乙肝患者虽然只表现为乙肝抗体(如核心抗体、e抗体等)为阳性,但是肝功能反复异常,这些人进一步检查HBVDNA往往为阳性,这些人也是乙肝现症感染者。
  
  2  HBVDNA检测虽然具有不少优势,但是决不能滥用由于该技术尚处于试验阶段,稳定性和统一性无法保证,同时该技术要求的实验室条件甚高,目前将其检测普及化,时机尚不成熟,硬性推广带来不少问题。使用先进的PCR及斑点杂交技术检测病毒或细菌的确有很大的优势,但是越是精密和先进的东西,要求的实验条件就越高,出现偏差的可能性就越大,开展PCR检测方法受到实验环境、试剂质量、实验器材等多方面因素的限制,一些地方不具备实验条件,环境污染、试剂质量有问题、技术人员素质差,这样可能造成不少假阳性,也可能造成假阴性,而形成漏网之鱼。因此PCR检测方法尚不能做到普及和大众化,要注意由于检验误差带来的负面作用,更要注意有人利用这些技术,谋取经济利益。
  
  3用乙肝病毒定量来说明疗效只在理论上有意义从目前实际看,乙肝病毒定量是一个随时都在发生变化的不稳定数值,影响数值变化的因素很多,治疗时数值可能发生变化,不治疗时,数值也会发生变化,数值变化有可能是治疗效应,也有可能是自然变化,或检验偏差。如果HBVDNA检测能够排除各种因素的干扰,实验条件控制的始终如一,消除各种偏差,定量的非常准确,那么,观察治疗前后DNA数值的变化,可以说明抗病毒疗效的好坏,但是从目前实际情况看,HBVDNA定量检测,还处于探索阶段,各种检测方法尚不完善,得出的数值左右漂浮,偏差很大。①用于检测HBVDNA定量的方法不统一。目前使用的检测方法主要有:荧光定量PCR技术、竞争PCR技术、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记引物法和PCR酶联化学发光法。②影响定量准确性的因素太多,导致结果的重复性差,其变异系数有时可达30%。极微量的核酸污染即可导致检测结果差异,实验室要求较高,实验材料需要一次性耗材,反复使用容易污染;在扩增待测序列之前还要将核酸加以纯化;PCR反应前后的工作区域需要隔离。③HBVDNA定量尚无国家统一标准,其正常值和异常值范围难以统一,各地、各单位检测数据没有可比性。④同一位患者抽血检查HBVDNA,其定量数值每天都在变化,即便是患者不进行任何治疗,定量检测到的数值都在时刻变化之中,同一份血清在不同的时间检测,或在不同的实验室检测,其数值都会有所不同。以这种时刻都在自然变化数值来说明疗效,也是难以令人信服的。⑤抽样误差无法避免,实验结果相差一个数量级(即10倍)是常有的误差。⑥单检制误差和临界值误差也是检测过程中,存在的避免的误差。⑦检测乙肝病毒DNA使用的PCR技术敏感性极高,实际操作中,极微量核酸污染即可出现假阳性结果。⑧实验室水平要求较高,实验室的隔离条件、清洁程度和仪器设备、试剂等不可能保证绝对的统一和规范,不少的条件简陋的小单位,随便买一个PCR检测仪,就开始收费检查。
  
  4用HBVDNA定量来说明病情严重性是错误的DNA定量无论高低都不能说明病情轻重。
  
  5乙肝病毒定量数值高,说明病毒复制程度高,具有传染性,但是决不意味着HBVDNA阳性的患者就是“毒王”摸不得,碰不得,乙肝病毒要传染必须具备传染途径和条件,否则病毒数量再多,也不会传染。只要乙肝病毒复制指标,例如HBVDNA、乙肝病毒e抗原、乙肝病毒前S抗原、乙肝病毒核心抗体IgM等,检测时出现阳性,都说明患者血液及体液含有复制状态的乙肝病毒,但是如果要让这些病毒传染给人,并且让人得上乙肝,并非一件容易的事。HBVDNA定量数值高,说明病毒复制活跃,血液具有传染性,但是无论病毒有多少、复制有多么活跃,要传染必须通过具体传染途径实现,接触乙肝患者不是乙肝的传播途径,传染性只针对输血、针刺、输液和垂直传播等途径,和乙肝患者共事、学习和工作不会导致乙肝的传播。对于成年人来说,乙肝病毒感染极少造成发病,绝大多数成年人感染乙肝病毒只是一过性的隐性感染,因为成年具备的正常的免疫功能,完全可以识别乙肝病毒,并迅速清除来犯之敌。如果儿童从来没有注射过乙肝疫苗,体内没有形成有效的抗体,一旦接触乙肝病毒,危险性比成年人大得多,如果所有的新生儿和未受过乙肝病毒感染的成年人都及时接种乙肝疫苗,体内产生了表面抗体,具备了预防能力,无论怎样和乙肝患者接触,也不会患乙肝。
  
  6并非所有的乙肝患者都必须检测HBVDNA一般来说乙肝患者化验检测“两对半”,如果为“大三阳”,此时DNA几乎都是阳性,但是有时“两对半”检查,乙肝病毒呈现“小三阳”,“小二阳”(乙肝病毒表面抗原和核心抗体阳性),甚至于在乙肝病毒表面抗原阴性时,检测HBVDNA却为阳性,只要是HBVDNA是阳性,证明患者依然是现症感染者,体内乙肝病毒仍在复制,仍有传染性,从这个意义上讲,HBVDNA检测非常重要,每一个可疑乙肝的人员,都应该检测DNA,但是它并非惟一一项可以用于说明乙肝病毒传染或复制的指标,和它一样重要的病毒学指标还包括前S抗原、e抗原和抗HBC  IgM等,它们之间有着许多相同的临床意义,在许多情况下,可以相互补充和完善诊断,有条件时,都应该检测。但是越是特异,越是敏感,对于检测的条件就要求越高,不是说以上指标重要,每个医院、每个检验科都必须设有这些检测项目,检测这些指标需要在高水平的实验室完成。这些指标多是诊断乙肝的辅助指标,加上化验费用较贵,如果都要查一遍,需要花费上千元,许多患者难以承受,一般来说,如果一个乙肝患者有经济实力,计划进行一个完整疗程的抗病毒治疗,必须在治疗前、治疗过程中以及治疗后,全面检测这些指标。如果患者不需要进行抗病毒治疗,或没有经济能力进行抗病毒治疗,反复检测这些指标实际是一种浪费。
(本文内容/图片来自于网络,仅供参考,一切诊断及医疗的依据请遵从医生的指导。)
更多>>

今日医学顾问

特别声明:养肝网内容仅供参考,不作为诊断及医疗依据。
Copyright © 2009-2018  Yangganwang All rights reserved
养肝网 版权所有 养肝护肝交流群