乙肝病毒最常用的血清学标志是：乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体，即“两对半”，或称乙肝病毒5项。
（1）乙肝表面抗原：是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。它可存在于患者的血液、唾液、汗液、泪液、鼻咽分泌物、精液及阴道分泌物中。在感染乙肝病毒后2～6个月，当丙氨酸转氨酶升高前2～8周时，可在血清中测到阳性结果。急性乙肝患者大部分可在病程早期转阴；慢性乙肝患者该指标可持续阳性。
（2）乙肝表面抗体：是对乙肝病毒免疫和保护性抗体。常在乙肝恢复后期出现阳性。此时乙肝表面抗原已转阴数月。血清中乙肝表面抗体滴度越高，保护力越强，持续时间也越长（3～5年以上）。再次感染乙肝病毒后，乙肝表面抗体可在2周内滴度明显升高。但也有乙肝表面抗体阳性而又发生乙肝者，这种情况可能为不同亚型感染。90％接受乙肝疫苗注射者的乙肝表面抗体可转阳。
（3）乙肝e抗原：在乙肝病毒感染后，表面抗原阳性同时或其后数日可测得乙肝e抗原。乙肝表面抗原在血内高峰期亦是乙肝e抗原的高峰期。在肝炎症状出现后10周内逐渐下降，在乙肝表面抗原转阴前可先转阴。如果乙肝e抗原阳性，则可发展为慢性持续性感染。乙肝e抗原阳性说明乙肝病毒在体内复制活跃，传染性强。在慢性乙肝患者中，乙肝e抗原指标转阴而乙肝e抗体转阳过程中临床上可出现明显的肝功能恶化。极个别情况下可见乙肝表面抗原阴性而乙肝e抗原为阳性。
（4）乙肝e抗体：在乙肝e抗原转阴后数月出现乙肝e抗体阳性。乙肝e抗体阳性预示患者的传染性已显著或相对降低，病毒复制程度已降低或明显缓解。近年发现个别乙肝e抗体阳性，但乙肝病毒DNA亦为阳性者的病情迁延不愈，这是感染了变异的乙肝病毒所致，临床上不可忽视。
（5）乙肝核心抗体：通常在乙肝表面抗原出现后3～5周，肝炎症状出现前即可在血清中检出。高滴度的乙肝核心抗体阳性常标志乙肝病毒正在复制，有传染性。可持续存在数年至数十年。低滴度的乙肝核心抗体表示乙肝病毒既往感染。
